产品货号:
GL1838
中文名称:
蔗糖溶血检测试剂盒(比色法)
英文名称:
产品规格:
50T
发货周期:
1~3天
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本试剂盒采用光电比色法,原理是在含蔗糖的低离子强度溶液中孵育红细胞,可大大促进补体与红细胞膜的结合,使对补体敏感的红细胞膜上形成小孔,蔗糖水进入红细胞内引起红细胞膜破裂,使PNH对补体敏感的红细胞溶血,主要用于检测人、动物血液的红细胞膜的缺陷,尤其用于鉴定阵发性睡眠性血红蛋白尿症,用光电比色法求出溶血百分比。
组分 | 规格 | 保存 |
PNH NaCl Buffer | 10mL | RT |
蔗糖盐溶液 | 10mL | -20℃ |
Alkaline Buffer | 15mL | RT |
保存:-20℃,有效期1年。
- 水浴锅、离心管、离心机
- 分光光度计或酶标仪、比色皿或酶标板
- 生理盐水、蒸馏水或去离子水
- 与患者同血型的正常新鲜血清
- 所用器具必须洁净干燥,以免溶血造成假阴性。
- 蔗糖溶液一旦出现污染,应弃用。
- 如果正常血清所含补体系统异常,可出现假阴性。
- 假阳性:溶血一般不超过5%,可见于自身免疫性溶血性贫血等疾病;如果加入血清量过多,亦可出现假阳性。
- 该实验可作为PNH的过筛实验,阴性可排除PNH,阳性应做酸化溶血实验证实。
- 试剂开封后请尽快使用,以防影响后续实验效果。
- 该试剂盒仅用于科研领域,不适用于临床诊断或其他用途。
- 制备50%红细胞悬液:取抗凝血,经生理盐水洗涤2~3次,用PNH NaCl Buffer重新悬浮红细胞。
- 制备蔗糖盐工作液:提前取出蔗糖盐溶液恢复至室温,按蔗糖盐溶液∶去离子水=1∶4稀释,即为蔗糖盐工作液。
- 按下表进行操作:
加入物(ml) 1 2 3 4 蔗糖盐工作液 0.9 0.95 0.95 — 50%红细胞悬液 0.05 0.05 — 0.05 待测血清 0.05 — 0.05 — Alkaline Buffer — — — 0.95 - 室温孵育1h,分别加入生理盐水4mL,低速离心,取上清。
- 以蒸馏水为空白对照,分光光度计或酶标仪于540nm处测定吸光度,分别命名为A1、A2、A3、A4。
溶血%=[A1- (A2+ A3)]/(A4+ A2)×100%
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